細(xì)胞凍存

1 選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。選擇匯合度70%左右的細(xì)胞。

2 凍存液的配制，確定你的配方?jīng)]有問題？

3 DMSO對(duì)細(xì)胞有毒性，把細(xì)胞加到凍存管后標(biāo)記好馬上放入凍存盒然后放入-80冰箱，過夜后轉(zhuǎn)移至液氮。（有人說-80放時(shí)間長(zhǎng)不好，4h后轉(zhuǎn)移至液氮，這個(gè)具體不清楚啦）

4 DMSO稀釋時(shí)放熱，所以提前10min左右配制好凍存液

凍存液配置和凍存程序是沒問題的，因?yàn)檫€同時(shí)凍存了幾管密度90%的同種細(xì)胞，復(fù)蘇后長(zhǎng)的不錯(cuò)。只是這次復(fù)蘇因?yàn)榕囵B(yǎng)基換了牌子，所以不知道是培養(yǎng)基的問題，還是因?yàn)榧?xì)胞凍存時(shí)密度低，凍存效果不好的原因。